Contribution a l’etude chimique de deux plantes Medicinales camerounaises ( Boswellia dalzielii Hutch. Et Echinops gracilis o. Hoffm) : evaluation de l’activite biologique de quelques extraits et composes isoles

Abstract

Le présent travail porte sur l’étude chimique et biologique de deux plantes médicinales camerounaises, Boswellia dalzielii Hutch. et Echinops gracilis O. Hoffm., dont le but est de contribuer à la lutte contre les maladies infectieuses d’origine microbienne, en recherchant des composés qui agiraient en synergie ou en large spectre d’action, pour conduire à une thérapie optimale. Ainsi, en utilisant un ensemble de techniques d’extraction, de séparation liquide-liquide et de chromatographie en phase liquide, telles que la Chromatographie sur Colonne (CC), la Chromatographie sur Couche Mince (CCM) et la Chromatographie sur Couche Mince Préparative, dix-sept composés ont été isolés des extraits au méthanol, au chlorure de méthylène et à l’acétate d’éthyle, des écorces du tronc de B. dalzielii, des racines et des parties aériennes de E. gracilis. On décompte, parmi ces composés, cinq flavonoïdes (le 7-hydroxy-4’-méthoxy- 6-O-β-D-glucopyranosylflavone, la quercétine, le 7-O-(4''-féruloyl)-β-D-glucopyranosyl apigénine, le 7-O-(4"-trans-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranosylapigénine, le 7-O-β-D- glucopyranosylapigénine), quatre phénylpropanoides (l’érythrinasinate, la Vogélate, l’acide férulique, l’acide p-coumarique), deux triterpènes pentacycliques (l’acide ursolique, l’acide oléanolique), deux stilbènes (le 4'-méthoxy -3-O-β-D-glucopyranosyl-(E)-resvératrol, le 4’- méthoxy-3-O- [2''-(-O-rhamnopyranosyl)-xylopyranosyl]-(E)-resvératrol, un phytostérole (le 3-O-β-D-glucopyranosyl-β-sitostérol), deux dérivés d’acide benzoique (le gallate de méthyle et l’acide gallique) et un sucre (le α-D-glucopyranoside). Les structures de ces composés ont été déterminées, par l’interprétation de leurs données de RMN 1D (1H, 13C, DEPT-135), 2D (HSQC, HMBC, COSY, NOESY) et dans certains cas par comparaison de leurs données avec celles décrites dans la littérature, ou par CCM comparative avec des échantillons authentiques disponibles. Parmi ces dix-sept composés, un flavonoïde à savoir le 7-O-(4"-féruloyl)-β-D- glucopyranosyl apigénine et un stilbène, le 4’-méthoxy-3-O-(2''-O-rhamnopyranosyl)- xylopyranosyl-(E)-resvératrol sont décrits ici pour la première fois. De même, les autres composés connus (EGF1 à EGF7) sont rapportés pour la première fois dans Echinops gracilis. Certains extraits et composés isolés ont été testés pour leur activité antibactérienne, antioxydante, anti-inflammatoire et cytotoxique. Les résultats sont les suivants : Les tests antibactériens ont été réalisés, sur les isolats cliniques de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Heamophilus influenza. L’extrait à l’acétate d’éthyle, la 7-O-(4"-féruloyl)-β-D-glucopyranosylapigénine et la 7-O-(4”-trans-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranosylapigénine isolés des parties aériennes de Echinops gracilis ont été pour la première fois répertoriés comme possédant une activité anti bactérienne. La 7-O-(4"-féruloyl)- L Thèse de Doctorat/PhD en Chimie Organique Rédigée et soutenue par Wéyépé Lah Fidèle Castro xxxiv β-D-glucopyranosylapigénine) a été significativement actif sur Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa et Klebsiella pneumonia avec des concentrations minimales inhibitrices de l’ordre de 31,25, 15,63 et 31,25 μg/mL, respectivement. Les tests antioxydants ont été effectués suivant la méthode de décoloration du radical cation ABTS (Acide 2,2′-Azino-bis-(3-Ethylbenzothiazoline-6-Sulfonique) et de l’évaluation du pouvoir réducteur, selon la méthode du FRAP. L’extrait à l’acétate d’éthyle, le 7-O-(4"- féruloyl)-β-D-glucopyranosyl apigénine et le 7-O-(4”-trans-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranosyl apigénine, isolés des parties aériennes de Echinops gracilis ont été pour la première fois, répertoriés comme possédant une activité anti oxydante avec des concentrations de piégeage du radical cation ABTS (CI50), d’une valeur de 13,59 ± 0,84 μg/mL, 108,25 ± 4,32 μg/mL, et 28,54 ± 2,18 μg/mL, respectivement. L’extrait à l’acétate d’éthyle, l’érythrinasinate, la vogélate et l’acide férulique issus des racines de E. gracilis, ont fait l’objet de test antiinflammatoire, suivant la méthode de dénaturation protéinique, induite par la chaleur et la méthode de l’action antiprotéinase, avec le diclofénac comme antiinflammatoire de référence. L’extrait à l’acétate d’éthyle a montré une capacité inhibitrice, avec une CI50 de 125,54 μg/mL. Il a aussi été efficace dans le blocage de la dénaturation protéinique, induite par la chaleur. L’érythrinasinate et la vogélate ont montré respectivement, une inhibition maximale de 78% et de 71% avec une CI50 de 463,5 et 413,7μg/mL, comparé au diclofénac qui a montré une inhibition maximale de 91%, avec une CI50 de 183,7 μg/mL. L’érythrinasinate et la vogélate ont ainsi été répertoriés, pour la première fois, comme possédant une activité anti-inflammatoire. En prélude à la détermination précise d’un indice de sélectivité cellulaire et d’une activité anticancéreuse, nous avons évaluer l'activité cytotoxique du 7-O-(4''-féruloyl)-β-D- glucopyranosyl apigénine, le 7-O-(4"-trans-p-coumaroyl)-β-D-glucopyranosyl apigénine et le 7-O-β-D-glucopyranosyl apigénine, contre des lignées cellulaires du cancer du sein MCF-7 et du cancer du col de l’utérus HeLa, à différentes concentrations en utilisant la méthode MTT. Le 7-O-(4''-féruloyl)-β-D-glucopyranosyl apigénine et le 7-O-β-D-glucopyranosyl apigénine ont montré un fort effet cytotoxique contre les lignées cellulaires HeLa, à 75 μM après 24 heures avec un pourcentage de viabilité des cellules cancéreuses inférieur à 1% pour le 7-O-β-D- glucopyranosyl apigénine et 10% pour le 7-O-(4''-féruloyl)-β-D-glucopyranosylapigénine.