Activités anti-salmonelle, antioxydante et modes d’action des extraits de Callistemon rigidus (Myrtaceae)

Abstract

Les salmonelloses sont responsables d’environ 300 000 décès chaque année dans le monde. La situation devient de plus en plus préoccupante en raison de l'émergence de la résistance aux antibiotiques actuellement recommandés. Cela suscite l’urgence de rechercher de nouvelles molécules bioactives. Les plantes de la forêt tropicale camerounaise constituent une source riche et diversifiée de composés bioactifs vis-à-vis des souches bactériennes. Callistemon rigidus R. Br. est un exemple de plantes médicinales dont les feuilles et écorces sont utilisées en médecine traditionnelle camerounaise pour soigner la toux, la bronchite et des infections du système digestif et respiratoire. La présente étude vise à évaluer les activités anti-salmonelle et antioxydante des extraits de Callistemon rigidus. L’extraction préalable des feuilles et écorces de Callistemon rigidus par macération successive dans divers solvants/système de solvants de polarité croissante a généré 38 extraits. L’activité anti-salmonelle de ces extraits a été évaluée sur quatre sérotypes (S. typhi, S. typhimurium, S. enteritidis et S. paratyphi B) par la méthode de microdilution. L’analyse phytochimique quantitative (teneurs en phénols, flavonoïdes et tanins condensés) des extraits bioactifs a été évaluée par des méthodes standards. La cytotoxicité des extraits bioactifs a été évaluée sur les macrophages de la lignée RAW 264.7 par spectrophotométrie. Les modes d’action des extraits bioactifs ont été explorés à travers leurs effets sur la cinétique de mortalité bactérienne, l’intégrité membranaire, les pompes à efflux et ATPases/H+ et la motilité bactérienne. L’activité antioxydante a été déterminée par les tests de DPPH, ABTS, FRAP, NO et H2O2. Des 38 extraits testés, les plus actifs étaient CRE Me(DCM) (CMI = 500 μg/mL sur S. typhimurium et S. typhi CPC) et CRE H2O(DCM) (CMI = 250 et 500 μg/mL sur S. typhimurium et S. typhi CPC, respectivement). Les teneurs en phénols totaux, flavonoïdes et tanins condensés de ces extraits étaient de 126,763 et 192,40 mg EAG /g, de 130,98 et 186,583 mg EQ/g et de 135,398 mg et 284,043 mg EAT/g, respectivement. Ces extraits étaient non cytotoxiques sur la lignée cellulaire RAW (CC50s : 76,285 μg/mL et 81,49 μg/mL, respectivement). La cinétique de mortalité de CRE Me(DCM) et CRE H2O(DCM) a montré un effet bactéricide dose dépendante observable à partir de 4 h d’incubation. Ces extraits ont déstabilisé la membrane externe (entre 40 et 50 % de déstabilisation à la CMI), perméabilisé la membrane interne et inhibé les pompes à efflux et ATPases/H+, et la motilité swarming (diamètre de motilité < 20 mm à la CMI) de Salmonella typhimurium et Salmonella typhi CPC. CRE Me(DCM) et CRE H2O(DCM) ont révélé une activité antioxydante en piégeant les radicaux libres de DPPH (CP50 de 18,65 et 46,48 μg/mL), ABTS (CP50 de 5,438 et 6,677 μg/mL), et NO (CP50 de 23,08 et 49,33 μg/mL) et en réduisant le fer ferreux en fer ferrique (CR50 de 47,165 et 54,15 μg/mL), et H2O2 en H2O (CR50 de 19,46 et 35,52 μg/mL). Ces résultats suggèrent que les extraits de Callistemon rigidus possèdent des activités anti-salmonelle et antioxydante, et pourraient constituer une source prometteuse de principes actifs à potentiel antisalmonelle.