Etude phytochimique et évaluation des activités antimicrobienne et phytotoxique de l’extrait au méthanol et des métabolites secondaires isoles des tiges et des feuilles de thecacoris cf. annobonae (euphorbiaceae)

Abstract

Le présent travail porte sur l’étude phytochimique et les propriétés pharmacologiques de l’extrait méthanolique et de certains métabolites secondaires isolés des tiges et des feuilles de Thecacoris cf. annobonae (Euphorbiaceae). C’est ainsi que des tiges et des feuilles de T. annobonae, nous avons isolé par des méthodes chromatographiques usuelles (CC, Chromatographie flash) vingt composés dont les structures de dix-neuf ont été élucidées grâce aux techniques spectroscopiques de RMN à 1D et 2D (RMN1H, RMN13C, DEPT, HMBC, HMQC, COSY), la spectroscopie de masse, l’IR, l’UV et les RX. La structure du vingtième composé est en cours d’élucidation. Parmi ces composés deux sont décrits ici pour la première fois. Il s’agit d’un nortriterpène : Le 30-nor-lup-20-en-28-oate de méthyle et un imidazole: Le (2E, 4R, 5R, 6S)-2-(4, 5, 6-trihydroxycyclohex-2-en-1-ylidène) acétonitrile. L’acide aristolochique I et l’acide aristolochique méthyl ester sont isolés ici pour la première fois d’un genre autre qu’Aristolochia. Les quinze autres composés obtenus se subdivisent en huit triterpènes pentacycliques : La bétuline, la friedeline, l’acétate de taraxéryle, le friedelan-3β-ol, l’acide bétulinique, le friedelane, le lupéol, et le 16-hydroxylupéol ; deux stéroides : Le β-sitostérol et le 3-O-β-D-glucopyranoside de β-sitostérol ; deux flavonoides : L’alpinumisoflavone et le 4’-O-méthyl alpinumisoflavone ; deux acides phénoliques : L’acide vanilique et l’acide 4-acétoxy-3-méthoxybenzoique et un phthalate: Le bis (2-éthyl hexyl) phthalate. L’extrait au méthanol des tiges ainsi que certains composés isolés des tiges de T. annobonae, à savoir : L’acide aristolochique I, l’acide aristolochique méthyl ester, l’acide vanilique, l’acide 4-acétoxy-3-méthoxybenzoique et le friedelan-3β-ol ont été évalués pour leurs activités antimycobactérienne, antibactérienne et antifongique par les méthodes de MABA (Microplate Alamar Blue Assay) et de microdilution sur quatorze espèces de microorganismes. Nous avons déterminé les Concentrations Minimales Inhibitrices (CMI) et Microbicides (CMM). Il en ressort que l’extrait au méthanol des tiges et l’acide aristolochique I sont capables d’inhiber la croissance de tous les microorganismes testés, à savoir : Les mycobactéries, les champignons et les bactéries Gram-positifs et bactéries Gram-négatifs avec des CMI comprises entre 9,76 et 312,50 μg/ml. Tous les deux montrent également une forte activité microbicide sur tous les microorganismes testés avec des CMM comprises entre 19,53 et 312,50 μg/ml. De plus, l’acide aristolochique I inhibe totalement l’activité du proton médié par l’enzyme H+-ATPase d’Escherichia coli lorsqu’il est testé aux valeurs de CMI. Le friedelan-3β-ol, l’acide 4-acétoxy-3-méthoxybenzoique, l’acide aristolochique méthyl ester et l’acide vanilique quant à eux sont inactifs sur les mycobactéries et ont montré une activité sélective variant de modéré à faible sur les bactéries et les champignons. Certains composés isolés des feuilles de T.annobonae à l’instar du 30-nor-lup-20-en-28-oate de méthyle, l’acide bétulinique, la friedeline, l’acide aristolochique I l’alpinumisoflavone et la 4’-O-méthyl alpinumisoflavone ont été également testés pour leurs activités antimicrobienne et phytotoxique par la méthode de diffusion sur gélose et par le test de croissance des jeunes plantes de salades sur neuf espèces de microorganismes. Les résultats que nous avons obtenu de l’activité antimicrobienne ont montré que le dérivé nouveau le 30-nor-lup-20-en-28-oate de méthyle présente une forte activité antimicrobienne sur Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptomyces viridochromogenes, Mucor miehei, Chlorella vulgaris et Scenedesmus subspicatus avec la zone d’inhibition de croissance comprise entre 10 et 16 mm. Les autres composés ont montré une faible activité sur Streptomyces viridochromogenes, Bacillus subtilis, Escherichia coli et Staphylococcus aureus respectivement. L’évaluation phytotoxique de ces mêmes composés a montré que tous les six inhibent la croissance des racines des salades à la concentration de 100 μg/ml.