Phenotypic and functional characterization of regulatory T cells in antiretroviral therapy naive HIV-1 infected people in Cameroon

Abstract

Les cellules T régulatrices (Treg) jouent un rôle important dans le maintien de l’homéostasie immunitaire en supprimant l’excès d’activation des cellules effectrices. Cependant, au cours de l’infection chronique à VIH, le système immunitaire est maintenu dans un état d’activation permanent qui pourrait altérer le phénotype et la fonction des cellules Treg. L’objectif général de cette étude était de décrire le phénotype et la fonction des cellules Treg chez des personnes adultes infectées par le VIH-1, naïves au traitement antirétroviral. Pour cela, les cellules Treg ont été purifiées à partir des cellules mononucléées obtenues du sang périphérique des participants (72 VIH-1+ et 38 VIH-), grâce à un protocole optimisé de tri cellulaire magnétique. Les propriétés phénotypiques des cellules Treg purifiées ont été déterminées au moyen de la cytométrie en flux multiparamétrique. Les corrélations entre les nombres/pourcentages des cellules Treg et le nombre de lymphocytes T CD4 d’une part et la charge virale d’autre part ont été établies à l’aide du test de Spearman. L’activité suppressive des cellules Treg a été évaluée à la suite de leur mise en culture avec les monocytes autologues en présence du Poly-ICLC. Les niveaux d'activation et de production des cytokines pro-inflammatoires par les monocytes ont ainsi été mesurés. Les données cytométriques ont été analysées avec la version 9.8.5 de FlowJo. Le logiciel Graph Pad Prism version 5.0. a été utilisé pour l'analyse statistique et les valeurs de P < 0, indiquaient un résultat statistiquement significatif. Nos travaux ont montré que la population des cellules Treg est dominée par les cellules effectrices et effectrices mémoires chez les personnes infectées par le VIH-1. Par ailleurs, ces phénotypes expriment fortement les marqueurs CD39, CD73, HLA-DR et CD38 (P<0,0001). Une corrélation positive a été observée entre le nombre total des cellules Treg et celui des lymphocytes T CD4 (r = 0,4, P <0.0001) puis, entre le pourcentage des cellules Treg et la charge virale (r= 0,5 ; P<0,0001). Le nombre de cellules naïves et centrales mémoires n’est pas affecté au cours de l’infection. En revanche, le nombre de cellules effectrices et effectrices mémoires diminue significativement (P<0,0001). Sur le plan fonctionnel, les cellules Treg se sont révélées capables de réguler l’activation et la production de l’IL-6 et du TNF-α par les monocytes autologues stimulés chez les participants immunocompétents. Comparativement aux participants avec des CD4 < 200 cellules/ mm3, les cellules Treg de ceux avec des CD4 ≥ 500 cellules/ mm3 ont exprimé de grandes quantités de TGF-β (P<0,001) et d’IL-10 (P<0,0001), deux cytokines clés dans l’activité suppressive exercée par les cellules Treg. En conclusion, l’infection à VIH-1 a une incidence négative sur le phénotype, les quantités et la fonction des cellules Treg. Par conséquent, le développement des stratégies immuno thérapeutiques qui visent à restaurer ces propriétés des cellules Treg pourrait être bénéfique pour la prise en charge de l’infection à VIH-1 à long terme.